一、細(xì)胞DNA定量分析系統(tǒng)技術(shù)原理

　　每一個(gè)正常的體細(xì)胞核內(nèi)均有23對(duì)染色體，只有增殖期的細(xì)胞才會(huì)有染色體的復(fù)制和加倍。但在生理狀態(tài)下，人體絕大多數(shù)的細(xì)胞處于靜止期，DNA含量相當(dāng)恒定。當(dāng)致癌因素作用于細(xì)胞早期，細(xì)胞核內(nèi)DNA結(jié)構(gòu)和含量發(fā)生改變，最終發(fā)展為細(xì)胞形態(tài)異常和惡性增殖。因此，細(xì)胞DNA定量分析系統(tǒng)可通過測(cè)量細(xì)胞核內(nèi)DNA含量的變化，在形態(tài)改變不明顯前即可檢測(cè)出那些病變細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)癌及癌前病變的早期診斷。

　　圖1 細(xì)胞DNA含量

　　癌癥是一種染色體疾病，致癌物質(zhì)、罕見的遺傳病癥以及偶發(fā)的有絲分裂錯(cuò)誤都是通過產(chǎn)生非整倍體引發(fā)腫瘤的，是一個(gè)漫長(zhǎng)的過程。

　　圖2 腫瘤發(fā)生發(fā)展示意圖

　　非整倍體讓數(shù)以千計(jì)的基因和它們編碼的蛋白處于失衡狀態(tài)，為細(xì)胞發(fā)展成更嚴(yán)重的非整倍體創(chuàng)造了條件。然而，從非整倍體早期發(fā)展成惡性腫瘤需要較長(zhǎng)的時(shí)間，在這段時(shí)間，醫(yī)生可以從容地進(jìn)行檢查和實(shí)施外科手術(shù)。在癌癥早期，還可以通過檢查非整倍體來區(qū)分惡性腫瘤和“相貌雷同”的良性腫瘤。當(dāng)癌癥進(jìn)入晚期，檢查與耐藥或轉(zhuǎn)移性相關(guān)的非整倍體，醫(yī)生就可以選擇最適合的治療方案。因此，早期發(fā)現(xiàn)DNA含量異常細(xì)胞對(duì)于腫瘤的防治具有重要的價(jià)值---- P. Duesberg, Chromosomal chaos and cancer, Sci Am 296 (), pp. 52-59.

　　二、全自動(dòng)DNA定量分析技術(shù)

　　全自動(dòng)細(xì)胞DNA定量分析系統(tǒng)是由麥克奧迪集團(tuán)**引進(jìn)加拿大不列顛哥倫比亞腫瘤研究院(BCCA)的腫瘤早期診斷新技術(shù)。該系統(tǒng)通過對(duì)細(xì)胞核內(nèi)遺傳物質(zhì) (DNA )倍體定量檢測(cè)，判斷細(xì)胞的生理狀態(tài)和病理改變、檢測(cè)癌及癌前病變。

　　圖3 Motic全自動(dòng)細(xì)胞DNA定量分析系統(tǒng)

　　系統(tǒng)特征

　　? 自動(dòng)化程度高、結(jié)果可靠，可重復(fù)性好;

　　? 克服人工觀察主觀性強(qiáng)、可重復(fù)性差的缺點(diǎn)，大大提高病變檢出率;

　　? 操作簡(jiǎn)便、速度快，操作者無需細(xì)胞學(xué)診斷經(jīng)驗(yàn);

　　? 報(bào)告結(jié)果圖形化處理，便于解讀;

　　? 檢測(cè)出早于形態(tài)變化的細(xì)胞核DNA含量變化的情況。

　　本系統(tǒng)還可通過評(píng)價(jià)細(xì)胞核各參數(shù)改變的程度，對(duì)腫瘤預(yù)后進(jìn)行判斷，指導(dǎo)腫瘤的治療。其操作簡(jiǎn)便，敏感性高，是癌及癌前病變篩查的有效工具?？舍槍?duì)包括宮頸脫落細(xì)胞在內(nèi)的多種婦科及非婦科臨床細(xì)胞學(xué)標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)。已廣泛應(yīng)用于歐美等發(fā)達(dá)國家的臨床診斷，并已獲SFDA認(rèn)證，是“宮頸癌防治工程”、“中華醫(yī)學(xué)會(huì)婦科腫瘤學(xué)分會(huì)”、“健康扶貧工程組委會(huì)”等優(yōu)秀機(jī)構(gòu)進(jìn)行宮頸癌篩查的指定技術(shù)。

　　三、細(xì)胞DNA定量分析技術(shù)在腫瘤早期檢測(cè)中的優(yōu)勢(shì)

　　圖4 傳統(tǒng)的細(xì)胞學(xué)人工在顯微鏡下診斷的特點(diǎn)

　　圖5 細(xì)胞DNA定量分析系統(tǒng)診斷優(yōu)勢(shì)

　　四、細(xì)胞DNA定量分析系統(tǒng)的臨床應(yīng)用價(jià)值

　　檢測(cè)出早期癌前病變細(xì)胞和癌細(xì)胞：在細(xì)胞惡變過程中，遺傳物質(zhì)(DNA)含量早于細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變，80-90%的惡性實(shí)體腫瘤內(nèi)存在非整倍體細(xì)胞。這種細(xì)胞的出現(xiàn)是提示早期惡性病變的重要標(biāo)志。因此，可通過細(xì)胞DNA定量分析系統(tǒng)檢測(cè)對(duì)細(xì)胞DNA進(jìn)行定量分析發(fā)現(xiàn)發(fā)現(xiàn)早期癌前病變細(xì)胞和癌細(xì)胞。

　　腫瘤的惡性程度及預(yù)后評(píng)估：整倍體腫瘤其預(yù)后通常較非整倍體腫瘤好。

　　指導(dǎo)腫瘤的治療：經(jīng)放、化療治療后，非整倍細(xì)胞是否消失直接反映治療的效果好壞。

　　提高細(xì)胞學(xué)檢測(cè)工作效率：僅需對(duì)約10%的可疑或陽性病例進(jìn)行復(fù)核，減輕醫(yī)生勞動(dòng)強(qiáng)度。

　　五、主要用途

　　(1) 用于婦科宮頸癌篩查;

　　(2) 用于非婦科的其他脫落細(xì)胞學(xué)的癌及癌前病變檢測(cè)

　　(3) 更廣泛的臨床應(yīng)用：

　　1) 表面刮取標(biāo)本片：例如陰道、宮頸、口腔、肛管、鼻咽部、眼結(jié)膜、體表病灶潰面等處。

　　2) 分泌物或排泄物標(biāo)本片：例如痰液、尿液、前列腺液、肛腸膿血排泄物、腫瘤之漏管分泌物、乳頭溢液等。

　　3) 在體表或體腔內(nèi)，液體或腫瘤實(shí)體的針吸穿刺檢查：例如胸腔、腹腔、四肢、軀干、肺、肝、脾、腎等。

　　4) 內(nèi)窺鏡直視下的刷片及組織印片：例如食管、胃、支氣管、泌尿道、結(jié)腸、直腸等。

　　圖6 細(xì)胞DNA定量分析系統(tǒng)的應(yīng)用

　　六、DNA定量細(xì)胞學(xué)檢測(cè)報(bào)告解讀：

　　該技術(shù)敏感性大于95%。液基薄層制片后，可同時(shí)做常規(guī)細(xì)胞學(xué)診斷，一份標(biāo)本，兩項(xiàng)檢測(cè)。實(shí)現(xiàn)優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)，提高病變檢出率。報(bào)告診斷建議明確清晰，易于解讀。

　　(1)正常細(xì)胞DNA指數(shù)值(DI)多為1，DNA指數(shù)值大于2.5為異常細(xì)胞。

　　(2)臨床建議：

　　a) ≥3個(gè)異常細(xì)胞或者細(xì)胞增殖比例大于細(xì)胞總數(shù)的10%，建議進(jìn)行陰道鏡檢查及活體組織檢查;

　　b) 1-2個(gè)異常細(xì)胞或細(xì)胞增殖比例在5-10%之間，建議4-6個(gè)月進(jìn)行復(fù)查，以便明確原因;

　　c) 無異常細(xì)胞，則可定期進(jìn)行正常篩查(2-3年)。

　　七、DNA定量分析報(bào)告

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