1. 腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞

　　腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞(Tumor Infiltrating Lymphocyte, TIL)是從手術(shù)切除的腫瘤組織或轉(zhuǎn)移的淋巴結(jié)中分離的淋巴細(xì)胞，經(jīng)細(xì)胞因子(如白細(xì)胞介素2)誘導(dǎo)活化，經(jīng)大量擴(kuò)增后回輸給病人。

　　2. TIL的分離與培養(yǎng)

　　臨床應(yīng)用需獲得足夠的TIL細(xì)胞，這取決于實(shí)際浸潤TIL細(xì)胞的數(shù)量及分離、擴(kuò)增TIL方法。臨床應(yīng)用的TIL細(xì)胞主要來源于手術(shù)切除或活檢所得的瘤體組織、癌性胸水、腹水中淋巴細(xì)胞及轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)。目前國內(nèi)外實(shí)驗(yàn)室分離培養(yǎng)TIL方法可獲得較理想的TIL群體。

　　3. 國內(nèi)外應(yīng)用TIL治療黑色素瘤的臨床研究

　　過繼細(xì)胞治療的優(yōu)點(diǎn)決定了它在腫瘤生物治療中的地位，已有的臨床研究也大都提示其具有良好的應(yīng)用前景。

　　年Rosenberg等首次應(yīng)用TIL靜脈回輸并聯(lián)合IL -2、環(huán)磷酰胺治療20例惡性黑色素瘤，其中12例達(dá)到部分或完全消退。年Steven A Rosenberg總結(jié)了NCI從年至年治療的86例晚期黑色素瘤患者，總有效率(%CR+PR)為34 %(表1)。詳見Journal of the National Cancer I
titute, Vol. 86, No. 15, August 3,

　　近來的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)提示在過繼細(xì)胞治療前清除宿主的內(nèi)源性淋巴細(xì)胞(包括調(diào)節(jié)性T細(xì)胞)對(duì)治療的成功與否至關(guān)重要。美國NCI外科部先采用環(huán)磷酰胺聯(lián)合氟達(dá)拉濱清除體內(nèi)免疫細(xì)胞，然后將體外擴(kuò)增的患者自身TIL回輸進(jìn)行過繼細(xì)胞治療。結(jié)果顯示，對(duì)于其他療法已無效的黑色素瘤患者采用上述治療獲得了51.4%的緩解率(8.6%CR+ 42.8%PR)，且平均緩解期達(dá)11.5±2.2個(gè)月，包括腦部在內(nèi)的臟器均對(duì)治療出現(xiàn)了反應(yīng)(圖1-3)。另外，Richard Morgan等還通過用體外給患者外周血T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)某種腫瘤抗原特異性的TCR的方法制備腫瘤特異性的T細(xì)胞，然后將轉(zhuǎn)導(dǎo)了TCR的T細(xì)胞大量擴(kuò)增后回輸給患者。結(jié)果顯示，15例轉(zhuǎn)移性黑色素瘤病人治療后有2例獲得了PR，緩解期分別達(dá)到了20和21個(gè)月。這一效應(yīng)細(xì)胞制備策略為拓展過繼細(xì)胞治療的應(yīng)用范圍提供了全新的思路。

　　圖1. 55歲男性黑色素瘤患者伴腋下及腦轉(zhuǎn)移經(jīng)TIL治療1個(gè)月后病灶開始消退，3個(gè)月獲得完全緩解。

　　Chapter 70: Cancer Immunotherapy Cancer: Principles & Practice of Oncology, 8th Edition -Devita, Hellman & Rosenberg's

　　圖2. 45歲男性黑色素瘤患者伴多發(fā)肝轉(zhuǎn)移，經(jīng)TIL治療后獲得完全緩解，緩解期超過4 年。

　　圖3. 30歲男性黑色素瘤患者伴皮下轉(zhuǎn)移，經(jīng)

　　TIL治療2周內(nèi)轉(zhuǎn)移灶開始消退，并獲得完全緩解且完全緩解期超過2年。

　　Chapter 70: Cancer Immunotherapy Cancer: Principles & Practice of Oncology, 8th Edition -Devita, Hellman & Rosenberg's

　　最新的一項(xiàng)研究中，Steven Rosenberg等采用化療聯(lián)合全身照射(Total Body Irradiation, TBI)的方法徹底清除患者體內(nèi)的免疫細(xì)胞后將體外擴(kuò)增的TIL回輸。結(jié)果顯示，化療+TIL治療組43例黑色素瘤患者有效率為49%;化療+2Gy TBI+過繼治療組25例患者有效率為52%;化療+12Gy TBI+過繼治療組25例患者有效率為72%(表1)。

　　表1 轉(zhuǎn)移性黑色素瘤患者過繼免疫治療

　　治療病例數(shù)有效率 (n(%))

　　PRCROR

　　No TBI(39.5)4(9.3)21(48.8)

　　2 Gy TBI(44.0)2(8.0)13(52.0)

　　12 Gy TBI(56.0)4(16.0)18(72)

　　注：所有患者均接受化療和ACT其中化療方案為環(huán)磷酰胺60 mg/kg 2天;氟達(dá)拉濱25mg/m2 5天。CR, 完全緩解; OR, 總有效率; PR, 部分緩解。

　　Steven A. Rosenberg Nature Reviews Cancer volume 8 April

　　我科采用DC-CIK過繼治療來替代大劑量化療從而達(dá)到改善患者免疫狀況的目的。DC-CIK、TIL序貫治療后患者一般狀況顯著改善，肺部轉(zhuǎn)移灶消失，肝轉(zhuǎn)移灶縮小;免疫功能監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，DC-CIK治療后患者免疫功能明顯改善。見圖4、5、6。

　　Day 0

　　采血

　　Day 13手術(shù)

　　Day 36

　　TIL回輸

　　Day 14、15

　　DC-CIK回輸